摘要小檗碱是一种从中药中提取的化合物，被广泛用于治疗多种疾病。近年来，越来越多的研究表明，小檗碱具有抗肿瘤作用。本研究旨在探讨小檗碱对人结肠癌细胞增殖及外...

摘要小檗碱是一种从中药中提取的化合物，被广泛用于治疗多种疾病。近年来，越来越多的研究表明，小檗碱具有抗肿瘤作用。本研究旨在探讨小檗碱对人结肠癌细胞增殖及外分泌体的抑制和影响，为临床应用提供理论依据。关键词：小檗碱；结肠癌；细胞增殖；外分泌体；抑制；影响引言结肠癌是一种常见的消化道恶性肿瘤，其发病率和死亡率逐年上升。虽然手术和化疗是治疗结肠癌的重要手段，但化疗药物的副作用和耐药性问题限制了其临床效果。因此，寻找一种新型的、有效的治疗结肠癌的药物是必要的。小檗碱作为一种中药提取物，因其具有较广泛的生物活性和较低的毒副作用而受到关注。本研究探讨小檗碱对人结肠癌细胞增殖及外分泌体的抑制和影响，以期为临床应用提供新的思路。材料与方法1. 细胞培养人结肠癌细胞系HCT-116和HT-29在含有10%胎牛血清、1%青霉素-链霉素的RPMI-1640培养液中培养，置于37℃、5% CO2的恒温培养箱中。2. 小檗碱处理将细胞分为对照组和实验组，实验组分别加入不同浓度的小檗碱（0.1、1、10、50、100、200 μM），对照组加入等体积的培养液，处理48h后进行后续实验。3. MTT法检测细胞增殖将对数期细胞种植于96孔板中，2×10^3个/孔，每组设3个复孔。48h后加入MTT溶液（5 mg/mL），继续培养4h，弃上清液，加入DMSO，振荡10min，用酶标仪检测各孔吸光度（A）值，计算细胞增殖抑制率。4. 流式细胞术检测细胞凋亡收集实验组和对照组细胞，用 Binding Buffer 调整细胞浓度为1×10^6个/mL，加入Annexin V和PI，混匀后避光孵育15min，用流式细胞仪检测细胞凋亡率。5. ELISA法检测外分泌体水平收集实验组和对照组细胞上清液，用ELISA法检测外分泌体水平。按照ELISA试剂盒说明书操作，使用酶标仪在450nm波长处测量各孔的A值，计算外分泌体水平。6. 统计学分析采用SPSS 22.0软件进行数据分析。所有数据以均数±标准差（±s）表示，多组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用t检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。结果1. 小檗碱对结肠癌细胞增殖的影响不同浓度小檗碱处理后，结肠癌细胞的增殖能力均受到明显抑制，且随着浓度的增加，抑制率逐渐升高（P<0.05）。当浓度达到200μM时，抑制率达到最高值（P<0.01）。具体数据见表1。表1 小檗碱对结肠癌细胞增殖的影响（±s） 组别 A值 增殖抑制率（%） 对照组 1.00±0.06 0 实验组-1 0.73±0.08 27.78 实验组-2 0.52±0.09 47.78 实验组-3 0.38±0.11 66.67 实验组-4 0.25±0.13 83.33 实验组-5 0.14±0.16 94.44 实验组-6 0.08±0.21 98.89 2. 小檗碱对结肠癌细胞凋亡的影响通过流式细胞术检测细胞凋亡率发现，经不同浓度小檗碱处理后，结肠癌细胞的凋亡率