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若实验需要纯化的淋巴细胞,可采用哪些方法将本次制备的单个核细胞悬液中的单核细胞去掉?PPT

在实验室中,有几种方法可以用来纯化淋巴细胞,并从单个核细胞悬液中去除单核细胞。以下是一些常用的方法: 密度梯度离心法使用密度梯度介质,如Ficoll-Pa...
在实验室中,有几种方法可以用来纯化淋巴细胞,并从单个核细胞悬液中去除单核细胞。以下是一些常用的方法: 密度梯度离心法使用密度梯度介质,如Ficoll-Paque,Percoll等,是一种常用的分离淋巴细胞的方法。密度梯度介质根据细胞密度的不同,将淋巴细胞和单核细胞分开。一般来说,淋巴细胞的密度比单核细胞低,所以在介质中会浮在上面,而单核细胞则会在下面。通过这种方式,可以收集到相对纯化的淋巴细胞。 免疫磁珠法免疫磁珠法是一种利用抗体和磁珠进行细胞分选的方法。这种方法利用了抗体能够特异性的结合到目标细胞上的抗原,然后将磁珠附着在抗体上。在磁场的作用下,目标细胞(如淋巴细胞)会被磁珠吸引并固定在磁场中,而其他细胞(如单核细胞)则会被冲走。通过这种方式,可以获得高度纯化的淋巴细胞。 流式细胞术流式细胞术是一种利用高速激光束照射细胞,然后分析其物理和化学特性的方法。这种方法可以用来区分淋巴细胞和单核细胞。通过设定特定的参数,可以分离出淋巴细胞,而单核细胞则会被排除在外。以上三种方法都可以用来纯化淋巴细胞并去除单核细胞,具体使用哪种方法取决于实验室的条件和需要纯化的细胞类型。密度梯度离心法的步骤:将单个核细胞悬液加入到装有密度梯度介质的试管中离心使细胞在密度梯度介质中分层去除上清液收集淋巴细胞层用洗涤液洗涤收集的细胞去除多余的介质再次离心使细胞沉淀,然后去除上清液用适量的培养基或生理盐水重悬细胞并进行后续实验或保存免疫磁珠法的步骤:将单个核细胞悬液加入到装有抗体的试管中让抗体与目标细胞结合加入磁珠使磁珠与抗体结合将混合物通过磁力分选装置进行分离去除未结合磁珠的细胞(主要为单核细胞)收集结合了磁珠的细胞(主要为淋巴细胞)用洗涤液洗涤收集的细胞去除多余的抗体和磁珠再次离心使细胞沉淀,然后去除上清液用适量的培养基或生理盐水重悬细胞并进行后续实验或保存流式细胞术法的步骤:将单个核细胞悬液加入到流式细胞仪中通过流式细胞仪的参数设置将淋巴细胞和单核细胞区分开通过特定的收集器收集淋巴细胞排除单核细胞用洗涤液洗涤收集的细胞去除多余的抗体和其他杂质再次离心使细胞沉淀,然后去除上清液用适量的培养基或生理盐水重悬细胞并进行后续实验或保存